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一种不同乙酰度的N-乙酰化壳六糖的分离纯化方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201310006368.4, 申请日期: 2014-03-05, 公开日期: 2014-03-05
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种乙酰化壳三糖的制备方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201210259734.2, 申请日期: 2012-12-19, 公开日期: 2012-12-19
作者:  李鹏程;  邢荣娥;  于华华
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一种从沙蜇刺丝囊毒素内分离溶血毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110414952.4, 申请日期: 2012-06-27, 公开日期: 2012-06-27
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白的方法  所述洗脱液为含不同浓度NaCl的磷酸缓冲液  收集采用含0.2M?NaCl的磷酸缓冲液洗脱下的组分  2)将上述所得洗脱组分经微孔滤膜过滤  其特征在于:1)将处理后的沙蜇刺丝囊细胞上清液经微孔滤膜过滤  NaCl浓度分别为0  滤液经凝胶色谱柱Superdex200采用0.15M?NaCl  滤液经含DEAE?Sepharose?Fast?Flow阴离子交换柱  0.1  10~50mM  采用洗脱液以1?3mLmin?1流速进行纯化分离  0.2  pH7.0PBS缓冲液以0.2~1.0mLmin?1流速进行分离纯化  收集洗脱液在低温下用3~5K的超滤管进行浓缩  0.3和2M  收集洗脱体积处于60~80mL的洗脱液  待用  而后在2~6℃下用3~5K的超滤管进行浓缩  浓缩后即得到从沙蜇刺丝囊毒素中分离溶血毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:  邢荣娥;  李鹏程;  于华华
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离  采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱  破碎后低温离心  收集上清液  首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱  流速为0.2?0.5mLmin?1  收集上清液  待用  而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  收集各洗脱峰  待用  收集各洗脱峰  其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。  而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩  待用  


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