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一种从霞水母刺丝囊毒素内分离致死毒素蛋白的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201110027667.7, 申请日期: 2011-09-07, 公开日期: 2011-09-07
作者:  于华华;  邢荣娥;  李鹏程
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一种从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白的方法  2)将上述步骤1)上清液于2~6℃下用缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)得到的上清液用强阴离子交换树脂Mono?Q预装柱纯化分离  其特征在于:1)将霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后用含Con?A?Sepharose?4B亲和柱进行分离  依次采用pH7.8  破碎后2~6℃离心  收集上清液  分离时采用含有0.1~0.3Mα?甲基?D?甘露糖苷和0.1~0.3MNaCl的pH7.4  浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液和含1M?NaCl的pH7.8  收集上清液  待用  浓度10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行洗脱并收集洗脱液  浓度为10~30mM的Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  待用  低温离心  流速为0.2~0.5mLmin?1  收集上清液  收集约25~40min洗脱液  待用  即为从霞水母刺丝囊毒素中分离致死毒素蛋白。  
一种从霞水母刺丝囊毒素内分离热激蛋白60的方法 专利
专利类型: 发明, 专利号: CN201010596892.8, 申请日期: 2011-08-17, 公开日期: 2011-08-17
作者:  邢荣娥;  李鹏程;  于华华
收藏  |  浏览/下载:38/0  |  提交时间:2014/08/04
一种从霞水母刺丝囊毒素中分离热激蛋白60的方法  2)步骤1)所得上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素于2?6℃下对pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液透析过夜  3)将步骤2)所得上清液过滤  4)将步骤3)用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩的浓缩物用凝胶树脂Superdex75柱纯化分离  其特征在于:1)将从霞水母触手中得到的霞水母刺丝囊细胞加入预冷缓冲液中破碎  然后低温离心  而后将其上含DEAE?SepharoseFast?Flow的阴离子交换树柱进行分离  采用含有浓度为0.15?0.5M的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液洗脱  破碎后低温离心  收集上清液  首先采用pH7.820mMTris?HCl缓冲液洗脱  流速为0.2?0.5mLmin?1  收集上清液  待用  而后采用含有浓度分别为0.1?2M不同浓度的NaCl的pH7.820mM?Tris?HCl缓冲液进行梯度洗脱  收集各洗脱峰  待用  收集各洗脱峰  其中流出体积50mL?80mL内的组分即为热激蛋白60。  而后用截留分子量为3kDa的超滤管浓缩  待用  


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