TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究

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	TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究
	闫庆龙 ; 冉铁成 ; 孔华庭 ; 张继超 ; 张瑜 ; 诸颖
刊名	核技术
	2019
卷号	42 期号:11 页码:67-74
关键词	Cas9核酸酶制备分布代谢
文献子类	期刊论文
英文摘要	Cas9核酸酶在CRISPR.Cas9系统中执行切割靶标脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)的重要功能,研究其在体内的代谢行为对活体水平的基因编辑具有重要的指导意义。本工作采用N-羟基琥珀酰亚胺酯键将近红外荧光染料Vivo TagS750与Cas9蛋白偶联,制备了标记率高达99%的TagS750-Cas9融合蛋白。采用荧光强度监测以及琼脂糖凝胶电泳的方法对Cas9蛋白在常见生理缓冲溶液中的稳定性及切割活性进行了鉴定,并将其尾静脉注射到BALB.c小鼠体内,通过监测TagS750-Cas9蛋白荧光强度的变化对其在体内的代谢和分布进行了研究。结果表明:TagS750-Cas9蛋白的体外稳定性良好,表面标记的TagS750并不影响Cas9蛋白的切割活性。TagS750-Cas9蛋白进入体内后,平均血浆消除半衰期(t1.2β)为55 h;主要分布于肝、肾、肺、脾脏中,心脏的分布较少;72 h可被机体完全代谢清除。研究结果为CRISPR.Cas9系统中Cas9核酸酶的体内应用奠定了基础。
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.sinap.ac.cn/handle/331007/32299]
专题	上海应用物理研究所_中科院上海应用物理研究所2011-2017年
作者单位	1.中国科学院上海应用物理研究所物理生物学研究室中国科学院界面物理与技术重点实验室上海同步辐射光源 2.中国科学院上海高等研究院张江国家实验室 3.上海莱士血液制品股份有限公司研发部 4.中国科学院大学
推荐引用方式 GB/T 7714	闫庆龙,冉铁成,孔华庭,等. TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究[J]. 核技术,2019,42(11):67-74.
APA	闫庆龙,冉铁成,孔华庭,张继超,张瑜,&诸颖.(2019).TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究.核技术,42(11),67-74.
MLA	闫庆龙,et al."TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究".核技术 42.11(2019):67-74.