基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌

	基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌
	陈旭 4; 毛瑞 3; 李堂正 2; 乔宇 1; 彭晴 1; 杜昱光 3
刊名	沈阳农业大学学报
	2019
卷号	050 期号:002 页码:174
ISSN号	1000-1700
英文摘要	食源性致病菌污染是食品安全问题的重要隐患之一,沙门氏菌是食品中最常见的食源性致病菌。为快速检测食品中的沙门氏菌,满足食品生产过程中实时检测监控的需要,基于竞争性互补介导核酸恒温扩增(competitive annealing mediated isothermal amplification,CAMP)技术,建立一种操作简便、准确性高、灵敏度高的沙门氏菌快速检测方法。以沙门氏菌invA基因保守区域片段为靶序列,利用DNAMAN设计特异性引物,并在己筛选获得沙门氏菌的CAMP引物基础上,应用CAMP引物设计推荐规则及作用位点,进行加速引物的设计和筛选,评估加速引物对扩增反应的影响;并且对建立的方法进行特异性及灵敏性的检测评估。同时与PCR方法进行比较。结果表明:以沙门氏菌invA基因为目标核酸所设计的一对CAMP引物可以实现对沙门氏菌的快速检测,而且在反应体系中引入加速引物可以将检测时间缩短15min;PCR方法的检测限为103CFU·mL^-1,而本研究所建立的方法在65℃恒温条件下80min内检出沙门氏菌,检测限为10CFU·mL^-1,检测效率和灵敏度均优于传统PCR方法,而且操作简便,无需精密、复杂的变温仪器;对3株沙门氏菌和10株非沙门氏菌进行特异性检测,3株阳性对照株检测全部为阳性,10株阴性对照菌检测全部为阴性,说明本试验所建立沙门氏菌快速检测方法具有良好的特异性,而且对沙门氏菌无漏检,具有较好的通用性。
语种	英语
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/35856]
专题	中国科学院过程工程研究所
作者单位	1.中国农业科学院饲料研究所 2.黑龙江大学 3.中国科学院过程工程研究所 4.沈阳农业大学
推荐引用方式 GB/T 7714	陈旭,毛瑞,李堂正,等. 基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌[J]. 沈阳农业大学学报,2019,050(002):174.
APA	陈旭,毛瑞,李堂正,乔宇,彭晴,&杜昱光.(2019).基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌.沈阳农业大学学报,050(002),174.
MLA	陈旭,et al."基于竞争性互补介导核酸恒温扩增技术快速检测沙门氏菌".沈阳农业大学学报 050.002(2019):174.