骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究

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	骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究
	成忠阳; 雷栓虎; 董晓丽; 郭丽; 黄良增; 岳海原; 张成俊; 郝俊龙; 汪玉良; 夏亚一
刊名	世界科技研究与发展
	2015
卷号	37 期号:2 页码:155-162,167
关键词	流式细胞仪表面标志物细胞分离细胞染色骨髓间充质干细胞
英文摘要	目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外分离培养;观察Brdu、DAPI以及Hoechst33342体外染色的合适时间和最佳剂量,比较三种方法的优缺点。方法BMSCs取自SD雄性大鼠的股骨和胫骨,然后采用贴壁分离培养法对BMSCs进行分离培养,当BMSCs培养至第三代时,采用流式细胞仪对其表面抗原CD34、CD44、CD45进行测定;同时分别用Brdu、DAPI以及Hoechs33342对BMSCs进行染色标记,Brdu标记效果用免疫细胞化学方法检测,DAPI和Hoechst33342的标记率用荧光显微镜观测,最后用MTT检测BMSCs的细胞增值率,观察三种不同方法体外染色的合适时间和最佳剂量,同时比较其优缺点。结果流式细胞仪检测发现BMSCs表达CD44阳性,CD34和CD45阴性;BMSCs染色前后其表面标志表达无明显统计学差异(P<0.05);Brdu染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是10 μmol/L、48小时;DAPI染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是20 μg/ ml、30分钟;Hoechst33342染色标记BMSCs的最佳浓度和时间是5 μg/ml、l小时。结论采用粘附贴壁分离培养法能够有效获取高纯度的BM-SCs;运用Brdu、DAPI以及Hoechst33342三种方法标记BMSCs效果良好,方法可靠、合理,为研究BMSCs体内追踪打下了基础。
资助项目	甘肃省自然科学基金计划
项目编号	陇原青年创新人才扶持计划资助 ; 甘肃省自然科学研究基金计划
语种	中文
CSCD记录号	CSCD:5417725
资助机构	GSSTD
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.lzu.edu.cn/handle/262010/187273]
专题	第二临床医学院_期刊论文
推荐引用方式 GB/T 7714	成忠阳,雷栓虎,董晓丽,等. 骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究[J]. 世界科技研究与发展,2015,37(2):155-162,167.
APA	成忠阳.,雷栓虎.,董晓丽.,郭丽.,黄良增.,...&刘京升.(2015).骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究.世界科技研究与发展,37(2),155-162,167.
MLA	成忠阳,et al."骨髓间充质干细胞的培养及其体外标记跟踪的实验研究".世界科技研究与发展 37.2(2015):155-162,167.