马铃薯栽培品种&#039;合作88&#039;细菌人工染色体文库的构建与评价

	马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价
	杨煜 1; 杨晓慧 1; 李灿辉 2; 郭晓 1; 单伟伟 1; 马伟清 1; 黄三文 3; 李广存 1
刊名	园艺学报
	2015
卷号	42 期号:2 页码:361-366
关键词	马铃薯细菌人工染色体文库抗病性
ISSN号	0513-353X
其他题名	Construction and Characterization of a Bacterial Artificial Chromosome Library of Potato Cultivar C88
英文摘要	以四倍体马铃薯栽培品种'合作88'培养12 ~ 15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100 ~ 300 kb片段,连接到载体CopyControl~(TM)pCC1BAC~(TM)的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。; A bacterial artificial chromosome library of potato(Solanum tuberosum L.)was constructed for'C88',a tetraploid potato cultivar conferring resistance to late blight,PVX and PVY,using BAC vector CopyControl~(TM) pCC1. Fresh leaf tissues from 12-15 day-old seedlings were used to isolate high molecular weight genomic DNA,and 100-300 kb partially HindⅢ digested DNA fragments were selected and ligated into the HindⅢ site of pCC1. The library consists of 850 000 clones and stored in 1 700 pools. The average insert size of BAC clones is about 90 kb and the empty clones consist of about 2.08%. The library is equivalent to 85 haploid potato genomes. Six randomly picked clones showed stable HindⅢ fingerprints after 5 days' successive culture,indicating that the clones in the library are stable. The library will facilitate gene cloning,sequencing and comparative genomics research of potato.
学科主题	农作物
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://111.203.20.206/handle/2HMLN22E/100575]
专题	蔬菜花卉研究所_生物技术研究室
作者单位	1.山东省农业科学院蔬菜花卉研究所, 山东省设施蔬菜分子生物学重点实验室, 济南, 250100 2.云南师范大学生命科学学院, 昆明, 650500 3.中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京, 100081
推荐引用方式 GB/T 7714	杨煜,杨晓慧,李灿辉,等. 马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价[J]. 园艺学报,2015,42(2):361-366.
APA	杨煜.,杨晓慧.,李灿辉.,郭晓.,单伟伟.,...&李广存.(2015).马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价.园艺学报,42(2),361-366.
MLA	杨煜,et al."马铃薯栽培品种'合作88'细菌人工染色体文库的构建与评价".园艺学报 42.2(2015):361-366.