高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化

	高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化
	张争; 张杨; 徐进; 许景升; 何礼远; 冯洁
刊名	植物保护
	2008
卷号	34 期号:2 页码:90-93
关键词	高GC PCR 正交试验
ISSN号	0529-1542
其他题名	Establishment and optimization of the PCR system for amplification of aac gene from GC-rich Ralstonia solanacearum
英文摘要	通过添加增效剂、正交试验设计优化PCR反应体系、联合采用多种PCR程序等措施，建立并优化了PCR扩增体系，成功地从高GC青枯菌基因组中扩增出了长度为2434bp且GC含量高达70．9Y00的aac基因。PCR反应体系为20pL包括5％DMSO、2．5mmol／LMgCl_2、500／xmol／L dNTP、10pmol／L引物、1．25U Taq酶、50ng模板DNA。首先采用热启动PCR：95℃5min，保持80℃，加入Taq酶；然后采用二步PCR：5个循环包括变性95℃1min，65℃1min；最后采用降落PCR：30个循环为95℃ 1min，78℃1min，每个循环降低0．5℃，72℃3min；补充10个循环为95℃1min，63℃1min，72℃3min；72℃10min。该试验体系的建立与优化为研究高GC含量生物的基因功能提供了方法。
学科主题	分子生物学 ; 农作物
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/135611]
专题	植物保护研究所_分子植病研究室
作者单位	中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点试验室, 北京, 100094
推荐引用方式 GB/T 7714	张争,张杨,徐进,等. 高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化[J]. 植物保护,2008,34(2):90-93.
APA	张争,张杨,徐进,许景升,何礼远,&冯洁.(2008).高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化.植物保护,34(2),90-93.
MLA	张争,et al."高GC含量青枯菌aac基因PCR扩增体系的建立与优化".植物保护 34.2(2008):90-93.