小麦原生质体高效转化体系的建立

doi:10.13430/j.cnki.jpgr.2017.01.015

	小麦原生质体高效转化体系的建立
	刘鑫; 魏学宁; 张学文; 张增艳
刊名	植物遗传资源学报
	2016-12-14
期号	01 页码:117-124
关键词	小麦原生质体核酸酶活性原生质体转化效率抗病相关基因亚细胞定位
ISSN号	1672-1810
DOI	10.13430/j.cnki.jpgr.2017.01.015
英文摘要	植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等。当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确。为避免这种情况,小麦原生质体制备及高效转化体系的建立与应用是必需的。在PEG介导的小麦原生质体转化过程中,原生质体分泌的核酸酶大量降解质粒DNA,转化效率的提高因此受到阻碍。为了建立小麦原生质体的高效转化体系,本文测试了抑制胞外核酸酶活性的因素和提高质粒DNA浓度等多个条件对转化效率的影响。结果表明,转化过程中加入双倍用量的质粒DNA进行转化,且始终保持低温环境(1℃)用以抑制核酸酶酶活性,可以使小麦原生质体的转化效率提高至85%。本文还将该系统成功地应用于2个小麦抗病相关蛋白的亚细胞定位研究,证明了该系统的高效性和实用性。该研究对未来相关研究有一定参考价值。
分类号	S512.1
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://ir.nais.net.cn/handle/2HMLN22E/129865]
专题	作物科学研究所_分子生物学系
作者单位	湖南农业大学生物科学技术学院;中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部麦类生物学与遗传育种重点实验室
推荐引用方式 GB/T 7714	刘鑫,魏学宁,张学文,等. 小麦原生质体高效转化体系的建立[J]. 植物遗传资源学报,2016(01):117-124.
APA	刘鑫,魏学宁,张学文,&张增艳.(2016).小麦原生质体高效转化体系的建立.植物遗传资源学报(01),117-124.
MLA	刘鑫,et al."小麦原生质体高效转化体系的建立".植物遗传资源学报 .01(2016):117-124.