中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆

	中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆
	何聪芳; 马有志; 辛志勇; 徐琼芳; 李连城
刊名	中国农业科学
	2004
卷号	37 期号:2 页码:163-169
关键词	中间偃麦草
ISSN号	0578-1752
其他题名	Construction of agropyrum intermedium 2Ai-2 Chromosome DNA Library and CLoning of Species-Specific DNA Sequences
英文摘要	以二体异附加系Z_2与其普通小麦亲本宛7107杂交F，的花粉母细胞为材料，用原位杂交方法确定其中的单价体为中间偃麦草2Ai-2染色体；在此基础上，以显微分离、回收、LA-PCR(Linker-adaptor PCR)扩增了该条染色体，扩增产物长度在0．1 5～3 kb之间，主要分布在0．2～2 kb。以α-~(32)P-dCTP标记的中间偃麦草的基因组 DNA为探针，对LA-PCR扩增产物进行杂交，证实扩增产物来自中间偃麦草。将扩增片段纯化后连接到质粒载体pUC18上，构建了2Ai-2染色体DNA文库。该文库包含约5×10~5个克隆。随机选取500个克隆进行分析，发现插入片段长200～1500 bp，平均580 bp。点杂交结果表明，56％为低／单拷贝序列，44％为重复序列。从文库筛选到4个中间偃麦草克隆。RFLP结果表明，3个为多态性低拷贝(Mag065、Mag088、Mag139)，1个为高度重复序列克隆(Mag104)。 GISH结果表明，Mag104为中间偃麦草染色体专化重复序列。
学科主题	农业基础科学
语种	中文
内容类型	期刊论文
源URL	[http://111.203.20.206/handle/2HMLN22E/106314]
专题	作物科学研究所_分子生物学系
作者单位	中国农业科学院作物育种栽培研究所, 农业部遗传育种重点开放实验室, 北京, 100071
推荐引用方式 GB/T 7714	何聪芳,马有志,辛志勇,等. 中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆[J]. 中国农业科学,2004,37(2):163-169.
APA	何聪芳,马有志,辛志勇,徐琼芳,&李连城.(2004).中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆.中国农业科学,37(2),163-169.
MLA	何聪芳,et al."中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆".中国农业科学 37.2(2004):163-169.